- 全部资讯
- 今天以内
- 本周以内
- 本月以内
- 最多浏览
- 最新分享
-
聚合酶链反应一单链构象多态性分析 (PCR-SSCP)
聚合酶链反应-单链构象多态性分析(Single Strand Conformation Polymorphism Analysis of Polymerase Chain Reaction Products, PCR-SSCP)是近年来发展起来的一种基因分析方法。2015-03-24 17:44 2100人看过来源:互联网
-
Southern 杂交
Southern 杂交是分子生物学的经典实验方法。其基本原理是将待检测的DNA样品固定在固相载体上,与标记的核酸探针进行杂交,在与探针有同源序列的固相DNA的位置上显示出杂交信号。通过Southern杂交可以判断被检测的DNA样品中是否有与探针同源的片段以及该片段的长度。该项技术广泛被应用在遗传病检测、DNA指纹分析和PCR产物判断等研究中。但由于该技术的操作比较烦琐、费时,所以现在有一些其他的方法可以代替Southern 杂交。但该技术也有它的独特之处,是目前其他方法所不能替代的,如限制性酶切片段的多态2015-03-24 17:36 1320人看过来源:互联网
-
放射性同位素标记的DNA序列测定分析
测定DNA的核苷酸序列是分析基因结构与功能关系的前提。从小片段重叠法到加减法、双脱氧链终止法、化学降解法、自动测序,DNA测序技术发展很快。目前在实验室手工测序常用Sanger双脱氧链终止法。Sanger法就是使用DNA聚合酶和双脱氧链终止物测定DNA核苷酸序列的方法。它要求使用一种单链的DNA模板或经变性的双链DNA模板和一种恰当的DNA合成引物。其基本原理是DNA聚合酶利用单链的DNA模板,合成出准确互补链,在合成时,某种dNTP换成了ddNTP,这时,DNA聚合酶利用2’,3’-双脱氧核苷三磷酸作底2015-03-24 17:23 1850人看过来源:互联网
-
PCR产物的克隆
PCR产物克隆大致分为两类,即平头连接和粘头连接。 平头连接是将制备好的平头载体和补平或削平的PCR产物直接进行连接。载体可用EcoR V或Sma I切成平头;PCR产物纯化后,可以在22℃用DNA聚合酶I作用30min(利用该酶所具有的3’→5’外切酶活性和5’→3’的聚合酶活性)。如果要求不高,PCR产物也可不加处理。如果使用Stratagene公司的pfu DNA聚合酶或New England Biolabs公司的Vent DNA聚合酶,这两种酶有5’→3’校对能力,扩增出来的PCR产物已经是2015-03-24 16:40 2473人看过来源:互联网
-
聚合酶链式反应(PCR)
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,为最常用的分子生物学技术之一。典型的PCR由(1)高温变性模板;(2)引物与模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是:将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;耐热的2015-03-24 16:20 2910人看过来源:互联网
-
目的基因的亚克隆
所谓亚克隆就是对已经获得的目的DNA片段进行重新克隆,其目的在于对目的DNA进行进一步分析,或者进行重组改造等。 亚克隆的基本过程包括:(1)目的DNA片段和载体的制备;(2)目的DNA片段和载体的连接;(3)连接产物的转化;(4)重组子筛选。2015-03-22 19:00 4923人看过来源:互联网
-
DNA片段回收与纯化
质粒、噬菌体等经酶切,电泳;PCR产物经电泳后,常常需要对一些DNA电泳片段进行回收和纯化,用于亚克隆、探针标记等。DNA回收和纯化常用方法有压碎法、低融点琼脂糖法、冻融法等,也有现成的试剂盒供应。2015-03-22 18:51 4466人看过来源:互联网
-
DNA分子的限制性内切酶消化
限制性内切酶可特异地结合于一段被称为限制酶识别序列的DNA序列位点上并在此切割双链DNA。绝大多数限制性内切酶识别长度为4、5或6个核苷酸且呈二重对称的特异序列,切割位点相对于二重对称轴的位置因酶而异。一些酶恰在对称轴处同时切割DNA双链而产生带平端的DNA片段,另一些酶则在对称轴两侧相对的位置上分别切断两条链,产生带有单链突出端(即粘端)的DNA片段。2015-03-22 18:41 5218人看过来源:互联网
-
λ噬菌体DNA提取
λ噬菌体是最早使用的克隆载体,λ噬菌体的基因组是一长度约为50kb的双链DNA分子,它在宿主细胞有两种生活途径,其一是裂解生长,环状DNA分子在细胞内多次复制,合成大量噬菌体基因产物,装配成噬菌体颗粒,裂解宿主菌再进行下一次感染;其二是溶源性生长,即感染细胞内λ噬菌体DNA整合到宿主菌染色体DNA中与之一起复制,并遗传给子代细胞,宿主细胞不裂解。2015-03-22 18:32 1752人看过来源:互联网
-
质粒DNA的碱裂解法提取与纯化
细菌质粒是一类双链、闭环的DNA,大小范围从1kb至200kb以上不等。各种质粒都是存在于细胞质中、独立于细胞染色体之外的自主复制的遗传成份,通常情况下可持续稳定地处于染色体外的游离状态,但在一定条件下也会可逆地整合到寄主染色体上,随着染色体的复制而复制,并通过细胞分裂传递到后代。2015-03-22 17:56 2264人看过来源:互联网

热门排行
- 12016上海CMEF,医械业界最盛大的的party又来啦
- 2华因康中国首创的精准医疗基因测序系统解决方案,光耀2016上海CMEF
- 3铭记我们共同的梦——名医传世年聚
- 4一名医生如何跨越从0到1这一步? ——珠江医院与医群科技共商医生培训系统的示范化打造
- 5一部医疗影视大片背后的故事
- 6医疗信息服务时代在靠近——医群科技与南方医科大学专家共商医疗产能转化
- 7医技流通新概念,名医传世课程开放周 ——骨科匠人和他们的螺钉钢板
- 8天命有常,惟有德者居之——广东医群科技有限公司第三期招商沙龙
- 9中国医药教育协会携手名医传世,助飞中国医疗质量提升
- 10建医疗高地解决“就医难”,人才培育是瓶颈

推荐阅读
- 基因编辑及干细胞培训班
- 百时美施贵宝Nivolumab获FDA批准用于接受过索拉非尼治疗后的肝细胞癌患者
今日公布,美国食品药品监督管理局(FDA)已批准Nivolumab静脉注射剂用于接受过索拉非尼治疗后的肝细胞癌(HCC)患者。1由于Nivolumab出色的肿瘤缓解率和缓解持续时间,获得了快速审评资格并获批该适应症。1这一适应症的持续批准将取决于后续确认性试验中能否证实并明确临床获益
- 2016非公立医疗创新国际大会:水母基因开启健康管理新时代
- CHINA-PHARM 2017 第二十一届中国国际医药(化妆品)工业展览会暨技术交流会
同期举办:中国国际食品加工及包装技术和设备展览会(Foodpex2017) 时 间:2017年11月7日- 10日 地 点:中国 上海新国际博览中心
- CheckMate-204研究首次公布研究数据,nivolumab与ipilimumab联合治疗对晚期黑色素瘤合并脑转移患者具有抗肿瘤作用
(2017年6月4日,美国新泽西州普林斯顿)- 百时美施贵宝公司(纽约证交所代码:BMY)今日公布了CheckMate-204研究的疗效和安全性数据。
- CheckMate-214 III期临床研究证实Nivolumab与Ipilimumab联合治疗在初治晚期及转移性肾细胞癌患者中具有显著生存获益
今日公布了CheckMate-214的III期临床研究结果,该研究旨在评估Nivolumab与Ipilimumab联合的方案对比舒尼替尼用于初治晚期或转移性肾细胞癌(RCC)患者的情况,包括关键亚组数据。在针对中高危患者总体生存(OS)的中期分析中(最短随访时间为17.5个月,OS为主要研究终点之一),与标准治疗舒尼替尼相比,Nivolumab联合Ipilimumab方案使死亡风险降低37%(HR 0.63; 99.8% CI: 0.44 to 0.89; P<0.0001)。