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显微技术的改善揭示了对细胞过程的新理解

研究人员显著提高了活细胞结构照明显微术(SIM)的分辨率,SIM是与其它超分辨技术相比有许多好处的一类显微术。

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其结果已经给人们就细胞过程提供了一个更为详细的了解,且对健康研究具有重要的意义。目前,许多其它类型的超分辨显微镜都有缺陷;例如定位显微术和受激发射损耗显微术必须使用高强度的光照和荧光标记才能获取图像,而这会对活体细胞造成损害,即使是在短时间之后。


SIM所用的照明强度水平要低得多,但到目前为止,它的分辨率一直限于衍射上限的两倍。为了提高SIM的分辨率,Dong Li 等人用了一种较高数值孔径(NA)的透镜。较高的NA不仅将SIM的分辨率从100纳米提高至84纳米,而且将激发限制在细胞容量的一小部分,从而进一步降低了光毒性并消除了失焦的背景。


在第二种方法中,该小组用处于某种波长的照明条纹来激活一个荧光蛋白亚组,并接着用处于第二种波长的条纹模式来诱导这些蛋白发射荧光。这两种照明模式的结合可给出62纳米的分辨率,这一分辨率比仅用一种模式所得到的分辨率要好得多。


研究人员接着用这些改善的分辨技术来获取对细胞过程的新的了解。例如,研究界就肌动蛋白在网格蛋白介导的细胞内吞中所起的作用存在着某些争论,但通过SIM分辨率的改善,Li等人能够确认,肌动蛋白的存在增加了网格蛋白内化的概率。他们的研究还用这些新的分辨度对其它数种细胞过程进行了探索,并为蛋白互动提供了漂亮的图像和卓越的细节。

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