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分离与分析人类肝细胞以及肝脏附属细胞的方法

最近,位于德国柏林大学夏丽特医学院一般内脏移植手术研究所的乔治‧达姆(Georg Damm) 及丹尼尔‧西赫佛(Daniel Seehofer)教授所带领的科学家团队建立一套简单的实验方法可以同时将人类活体肝脏中的肝细胞(PHH)、库佛氏细胞(KC)、肝脏内皮细胞(LEC)以及肝脏星状细胞(HSC)分离。

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首先,利用乙二胺四乙酸/胶原酶灌流技术先将肝细胞分离出来;接着,再使用Percoll分层液离心、附着分离方法(分离KC)以及磁激活细胞分离法(分离HSC, LEC)将各种不同的肝脏附属细胞分别分离出来。各种不同方法分离出来的细胞在培养的同时都会进行外观上或是功能上的特征分析用以确保细胞之纯度。


乔治‧达姆教授指出:“单独培养肝细胞被认为是研究肝脏代谢以及异生素的毒性的标准方法;但是,过去许多详细的形态及功能性研究指出,由于肝细胞在短短的几天内就会因为去分化以及失去功能性,使的这样的方法有其限制性。若能重新建构出与体内结构相似、包含肝脏附属细胞的三维环境,将可解决一些过去所面临的问题。总之,我们建立了一套简易的方法可同时从同一个肝脏器官中分离出肝细胞以及各种不同肝脏附属细胞;而这些不同的细胞可以展现出他们原本该有的外观特性、特殊标记以及功能性。 ”


将来的研究将探讨这些分离出来的肝脏附属细胞在共同培养模式中以及人工制造的微组织中,他们彼此之间互动的关系。整体而言,这个实验方法提供了一个用以研究肝脏生理以及病态生理的基础。


实验生物及医学期刊的总编辑史帝夫‧古德曼教授说“Pfeiffer 等科学家提供了一个简易的方法可以从同一个人体的肝脏中同时分离肝细胞以及各种不同的肝脏附属细胞。此新颖方法的价值在于可以用于发展共同培养肝细胞以及肝脏附属细胞的方法,并且在未来可应用于新药测试以及肝脏组织工程方面”。


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