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电穿孔技术或提高CRISPR/Cas9系统效率

发表于国际杂志Genetics上的一篇研究论文中,来自美国杰克逊实验室(Jackson Laboratory)的研究人员通过研究表明,利用一种电流来运输CRISPR/Cas9系统对实验室小鼠进行工程化的遗传改造,或许可以明显而且有效地改善CRISPR/Cas9系统的作用效率。

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CRISPR/Cas9系统可以精确高效地对实验性材料进行遗传修饰来制造用于研究人类疾病的模型,而通过将该系统注射入受精卵就可以制造出携带单一突变、多种基因突变或其它机体修饰的工程化小鼠,CRISPR/Cas9系统技术非常有效,但其需要进行显微注射,这种显微注射要求较高而且非常耗时。


研究者Haoyi Wang教授说道,这项研究中我们利用一种电穿孔技术就可以高效快速地替代显微注射,而电穿孔技术即是利用电流来增加细胞膜的可透性;电穿孔技术的开发或可对动物模型进行高效高通量地基因组修饰编辑作用,而且利用该技术,研究者就可以使得由原先一次只能进行单一受精卵操作提高到一次可以对20至50个受精卵进行操作了。


如今研究人员就可以高效、高通量地制造产生用于进行人类疾病研究的小鼠模型了,而文章中研究者首次利用弱酸溶液来使得包裹受精卵的透明带变弱,随后研究者检测了多个电压来寻找最适合的电压,在不损伤受精卵的情况下还可以将CRISPR/Cas9组分运输到细胞内部。


最后研究者表示,这种电穿孔技术不仅侵入性较小,而且不会损伤受精卵,后期我们还将通过更为深入的研究来对当前技术进行优化,从而更加使得其可以更加高效地应用于研究中。


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